Taq DNA Polymerase

• 고순도로 정제된 recombinant Taq polymerase 입니다.
• Taq polymerase뿐만 아니라, reaction buffer, dNTP mixture, magic buffer, nuclease free water, loading buffer가 함께 제공되어 사용이 편리합니다.
• Fidelity가 중요하지 않은 일반적인 PCR application에 적합합니다.
• MgCl₂ 필요여부에 따라 reaction buffer를 선택적으로 구매할수 있습니다.
• Magic Buffer 사용으로 증폭하기 어려운 구조의 target DNA도 증폭이 수월합니다.
• 증폭길이
  • lambda DNA : ~6kb까지 (Max. ~12kb)
  • human genomic DNA : 2kb까지(Max. ~4Kb)

• 제품구성
  • Taq DNA polymerase (5unit/ul)
  • 10X Reaction buffer
  • MgCl2 Stock SoIution (25mM MgCl2)
  • dNTP mixture (2.5mM each)
  • Magic buffer
  • Nuclease free water
  • 10X Loading buffer
• Reaction Mixture

  Component	Vol.	Final Concentration
  		Taq DNA polymerase	Taq DNA polymerase (MgCl2 free reaction buffer)
  10X Taq buffer	2ul	1x, with MgCl2	1x
  dNTP Mix	2ul	200uM each
  MgCl2 Stock	1.2 - 3.2ul	-	1.5 - 4mM
  Forward Primer	variable	0.2 - 1uM
  Reverse Primer	variable	0.2 - 1uM
  Template DNA	variable	< 1ug
  Magic Buffer	variable	0 - 5ul
  Taq DNA polymerase	0.2ul	1 unit
  dH2O	variable	up to 20ul

사용예
• Enzyme Activity
  

  Taq DNA polymerase의 단위 증폭 능력을 측정하기 위하여, 다양한 효소농도를 사용하여 1ng의 lambda(A)와 E.coli(B) genomic DNA로부터 PCR 반응을 수행하여 각각 500bp, 143bp의 PCR 산물을 얻었다. 사용된 효소는 원액(50U/ul)을 희석용액으로 1/5, 1/10, 1/50, 1/100 serial dilution하여 사용하였다.
• High GC Contents
  

  Human genomic DNA의 증폭은 타겟 DNA의 높은 GC함량이나 복잡한 2차구조의 형성으로 인해 증폭에 어려움을 겪는 경우가 많다. 4x Magic Buffer를 사용하여 증폭하기 어려운 human genomic DNA의 -3kb 증폭을 수행한 예를 볼 수 있다. 1unit의 Taq DNA polymerase 반응액에 Magic Buffer(0.5x-2x)를 첨가해 줌으로써 10ng의 human genomic DNA로부터 효과적으로 3kb의 PCR 산물을 증폭하였다.
• DNA 잔존량
  

  E.coli genomic DNA의 오염정도를 체크하기 위하여 Ori region을 nested PCR로 증폭하였고 (2nd PCR 143bp), Koma Taq DNA Polymerase는 E.coli genomic DNA의 contamination을 확인할 수 없었다. 이 테스트는 lane 9-12의 결과로 보아 검출한계가 1-10fg으로 해석될 수 있으며, 따라서 Koma Taq DNA contamination은 nested PCR의 검출한계보다도 미량으로 볼 수 있다.

• EzWay™ PCR Master Mix
• EzWay™ PCR Ready Mix