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 제품안내  면역학   Cancer Research  Luciferase Assay

Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit

Firefly와 Renilla luciferase는 유전자의 조절(Regulation)이나 기능(Function) 또는 신약 스크리닝을 위해 널리 사용는 reporter gene으로, Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit은 배양세포 내에서 간편하고 효율적으로 Firefly와 Renilla luciferase reporter 효소의 정량 및 측정이 가능하도록 디자인된 제품입니다.

Biotium
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특징
  • Firefly와 Renilla luciferase는 reporter gene으로서 유전자의 조절(Regulation)이나 기능(Function) 또는 신약 스크리닝을 위해 널리 사용되어집니다.
  • Renilla Luciferase는 종종 multiplex transcriptional reporter assay에서 transfection 정도를 표준화(normalization)하는 컨트롤로써 Firefly luciferase와 함께 사용되어집니다.
  • 다른 많은 효소들과 마찬가지로, Firefly luciferase와 Renilla luciferase는 Michaelis-Menten kinetics 방식을 따르므로 기질과 co-factor에의한 과정없이는 최대 빛 발산에 도달하지 않습니다.
  • 이러한 조건으로 실험이 진행될 때, 반응으로부터 방출되는 빛은 luciferase 효소 분자수에 비례합니다.
  • Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit은 배양세포 내에서 간편하고 효율적으로 Firefly와 Renilla luciferase reporter 효소의 정량 및 측정이 가능하도록 디자인된 제품입니다.
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장점
  • Linearity and Sensitivity: Firefly 또는 Renilla luciferase reporter에 DNA (0.001ug에서 1ug) 를 재조합하여 transfection을 한 후, luciferase 유전자와 빛 output 을 선형화 할 수 있습니다.
  • Low Autoluminescence: Renilla luciferase로 인해 자연발광 백그라운드를 줄이고 민감도를 높입니다.
  • Convenience: 하나의 Kit로 Firefly와 Renilla luciferase의 측정이 가능합니다.
사양
  • 제품구성
    100 assays 구성품 (30005-1)   2 x 1mg D-Luciferin
    1 x 100ul Coelenterazine, 100 X
    1 x 10ml Passive Lysis Buffer, 5 X
    1 x 10ml Firefly Luciferase Assay Buffer
    1 x 10ml Renilla Luciferase Assay Buffer
    1 x 10ml Renilla Luciferase Assay Enhancer
    1 Protocol
    1000 assays 구성품 (30005-2)   2 x 10mg D-Luciferin
    1 x 1ml Coelenterazine, 100 X
    1 x 30ml Passive Lysis Buffer, 5 X
    1 x 100ml Firefly Luciferase Assay Buffer
    1 x 50ml Renilla Luciferase Assay Buffer
    1 x 50ml Renilla Luciferase Assay Enhancer
    1 Protocol
원리
Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit 원리
Figure 1. Bioluminescent reaction catalyzed by Firefly Luciferase.
Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit 원리
Figure 2. Bioluminescent reaction catalyzed by Renilla Luciferase.
적용
Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit 적용
Figure 3. Dose response curve of transfected Firefly & Renilla Luciferase gene.
PC3 cells were transfected with 0.001ug, 0.01ug, 0.1ug, and 1ug pFL-CMV and pRL-CMV vectors (Promega) encoding Firefly and Renilla luciferase gene by Fugene 6 (Roche) in 6-well cell culture dishes. pGL2 Basic vector (Promega) was used as a control and for normalizing total DNA vector level to 2ug per transfection. 24 hours after transfection, cells were harvested using 500ul lysis buffer contained in Biotium's Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit. To assay luciferase activity, 20ul of lysate from each sample was then added to 100 ul of Firefly Luciferase Assay Buffer or 100ul of Renilla Luciferase Assay Buffer plus Enhancer from Firefly & Renilla Luciferase Assay Kit. Luminescence was measured on a luminometer (Tumer Designs). Light emission was integrated over 10 secends without initial pre-read delay.