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GPCR 항체 프로파일링 서비스 | GPCR Antibody Profiling Services 이미지

GPCR 항체 프로파일링 서비스 | GPCR Antibody Profiling Services

Maker : MULTISPAN

GPCR 표적에 대한 항체 결합도를 측정함으로써, 항체의 효능을 확인하고 off-target에 대한 교차반응성을 테스트해 드립니다.

특징

 

항체는 뛰어난 특이성과 민감성으로 인해 연구, 진단 및 치료에 필수적으로 사용됩니다. 

특히 신약개발을 위한 표적 검증 연구는 ELISA, cell-based ELISA, FACS, WB, IHC등의 다양한 분석법에서 단백질 식별을 위해 항체를 사용해 왔습니다.

GPCR에 대한 항체 제작도 많은 진전이 있었으나 여전히 높은 친화도와 특이성을 가진 GPCR 항체를 생산하는 것은  과제로 남아 있습니다. 

이유는 ,

1, 복잡한 7중 막 관통 단백질 구조로 인해 항원 또는 panning에 사용할 수 있는 extracellular epitope가 제한적 입니다. 

2, 유전체에 암호화된 수많은 GPCR의 주요 서열 및 구조적 유사성으로 인해 GPCR 항체는 교차 반응성을 보입니다. 

3, GPCR 표적에 대한 항체의 on-target, off-target을 프로파일링하는 cell-based assay를 개발하고 실행하는 것이 기술적으로 어렵고 복잡하기 때문입니다.

 

 

  • Multispan의 GPCR Antibody Profiling Service는 GPCR을 발현하는 stable cell line을 바탕으로 binding 및 functional assay에서 GPCR 표적에 대한 GPCR 항체의 효능을 확인하고, GPCR off-target에 대한 교차 반응성 위험도, human 및 ortholog GPCR의 비교를 제공합니다.
  • 500개 이상의 GPCR 안정 세포주에서 선택한 각 프로그램에 대해 맞춤형 패널을 구축하고 프로파일링할 수 있습니다.
  • 치료용 GPCR 항체 개발 프로그램의 경우, 표적 유도 내재화, 칼슘, cAMP, β-arrestin, 방사성 리간드 결합, GTPγS, 화학주성, 사이토카인 분비, 세포 증식 분석과 같은 특정 기능 분석을 선택할 수 있습니다.

  


서비스 사례 

시중에서 판매되는 anti-CCR5 단일클론 항체를 표준 FACS 분석법으로 프로파일링하여 5개의 다른 케모카인 수용체를 포함한 43개의 GPCR 패널에 대한 결합을 확인했습니다. 이 분석은 HEK293T 세포의 세포막에 발현된 GPCR에 대한 항체의 세포 외 결합만을 측정하기 위해 비투과성 항체 염색 조건에서 수행되었습니다. 아래 그림과 같은 결과는 다른 케모카인 수용체를 포함하되 이에 국한되지 않는 광범위한 교차 반응성을 보여주었습니다. CCR5 항체 결합의 형광 강도 기하 평균은 모든 시험 대상 GPCR의 공통 epitope tag에 대한 anti-Flag 항체 염색을 통해 수용체 표면 발현에 대해 정규화되었습니다. 이 정규화 단계는 서로 다른 수용체의 불균등한 발현을 방정식에서 제거하여 데이터가 각 GPCR 표적에 대한 CCR5 항체의 결합을 정확하게 반영할 수 있도록 합니다. 단일 농도의 CCR5 항체를 시험했습니다. 각 GPCR에 대한 결합 효능은 용량-반응 곡선의 후속 프로파일링을 통해 얻을 수 있습니다.




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