줄기세포 생존력 향상을 위한 CEPT Cocktail Kit | 고마바이오텍

CEPT란?

기초 연구와 치료 응용 분야에서 줄기 세포를 성공적으로 사용하는 데 있어 오랜 과제는 스트레스에 대한 세포의 민감성으로 인해 광범위한 세포 사멸이 발생한다는 것입니다.

CEPT Cocktail은 PSC의 생존력을 향상시키는 Chroman 1 (Cat. No. 7163), Emricasan (Cat. No. 7310), Lyophilized Polyamine Supplement x1000 (Cat. No. 7739) 및 Trans-ISRIB (Cat. No. 5284) 소분자의 조합으로, 줄기세포 실험의 모든 단계에서 다능성 줄기세포(PSC)의 생존율을 높이고, 배아체/오가노이드 형성 시기에 세포 생존률을 크게 향상시킵니다.  

CEPT Cocktail은 줄기세포 계대 과정에서 세포 스트레스와 DNA 손상을 줄이고 세포 접착을 촉진함으로써 줄기세포 보호 기능을 제공하여, 질병 모델링, 약물 스크리닝, 재생 의학 및 세포 치료를 위한 세포 제조를 개선할 수 있는 광범위한 잠재력을 가지고 있습니다. 

CEPT Cocktail Kit 구성 성분  

• Chroman 1 (#7163) : ROCK1/2 경로를 억제하여 세포 생존을 촉진합니다.
• Emricasan (#7310) : pan‑caspase 억제제로, Chroman 1과 함께 PSC의 세포 사멸을 억제합니다. 
• Trans-ISRIB (#5284) : 통합 스트레스 반응을 억제하여 단백질 합성과 세포 부착을 지원합니다. 
• Polyamine Supplement (#7739) : Putrescine, Spermidine, Spermine을 포함하며, 세포 성장 및 구조 안정화에 기여합니다.
  
• DMSO (#3176) : Compound를 안정적으로 용해하기 위해 사용됩니다.

특징

• PSC culture시 polyamine이 Chroman 1, Emricasan, Trans-ISRIB과 함께 사용될 경우, polyamine은 cell attachment와 protein translation을 크게 향상시켜줍니다. 
• CEPT는 long-term passaging, single cell cloning, gene editing, PSC differentiation시 cell survival을 향상시켜줍니다. 
• 또한 differentiated cell의 냉동 보관 후에도 세포 생존력을 증가시켜줍니다. DMSO Control과 비교했을 때, Cardiomyocyte의 생존률은 36%, motor neuron 생존율은 63%까지도 증가하였습니다. 
• 장기 계대 (passaging), 냉동 보존 (cryopreservation), 단일 세포 클로닝, 그리고 오가노이드 형성 등 다양한 줄기세포 실험에 사용됩니다.

적용 

• 일상적인 장기 계대 배양 (passaging)
• 냉동보존 및 해동
• 단일 세포 클로닝 (single‑cell cloning)
• Organoid 및 Embryoid Body 형성
• 유전자 편집 (gene editing)
• 분화 과정 전반

종류  

인간 다능성 줄기세포(hPSC)를 위한 확장 가능한 단일 세포 클로닝(single-cell cloning) 워크플로우 모식도 

이 워크플로우는 'CEPT 칵테일'과 'Namocell 미세유체 세포 분주 기술'을 결합하여, 단일 세포 클로닝 과정이 안전하고 효율적이며 실용적으로 이루어지도록 보장합니다. 이 모식도는 간소화된 고효율 단일 세포 클로닝, 세포 특성 분석, 그리고 잠재적인 후속 응용 분야에 필요한 단계들을 강조하고 있습니다. (Tristan et al. 2022년, Nat. Protoc. 논문에서 수정/인용함)