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[FAQ] EverBrite™ Mounting Medium는 무엇인가요?

Maker : BIOTIUM

EverBrite™ Mounting Medium & CoverGrip™ Coverslip Sealant에 대한 질문과 답입니다.

1. EverBrite™ Mounting Medium는 무엇인가요?

Immunofluorescence (IF) imaging 시, CF dye를 포함한 형광 dye의 형광성을 유지시켜주는 antifade mounting medium 입니다. 

2. EverBrite™ Mounting Medium의 굴절률(refractive index)은 얼마인가요?

EverBrite™ Mounting Medium (#23001)과 DAPI 가 포함된 EverBrite™ Mounting Medium (#23002)는 둘 다 굴절률이 1.46입니다. EverBrite™ Hardset Mounting Medium (#23003)과 DAPI가 포함된 EverBrite™ Hardset Mounting Medium (#23004)는 둘 다 초기 굴절률이 1.38이며, 24시간 경화 후 1.42로 증가하고, 4일 후에는 1.46이 된 후 일정하게 유지됩니다.

3. EverBrite™ Mounting Medium은 Alexa Fluor® 염료 또는 Cy® 염료와 호환되나요?

네, EverBrite™ Mounting Medium은 다양한 염료와 호환됩니다. VectaShield®와 달리, EverBrite™는 Alexa Fluor® 647, Cy®3, 또는 Cy®5와 같은 사이아닌(cyanine) 기반 형광단(fluorophores)과 간섭하지 않습니다. (*AlexaFluor는 Thermo Fisher Scientific의 등록 상표입니다. Cy Dye는 Cytiva의 등록 상표입니다. VectaShield는 Vector Laboratories의 등록 상표입니다.)

4. 마운팅 후 샘플에서 EverBrite™ Mounting Medium을 제거할 수 있나요?

EverBrite™ 습식(wet-set) 마운팅 배지는 수성이며 글리세롤을 포함하는 배지입니다. PBS 또는 다른 버퍼로 여러 번 세척하여 샘플에서 제거할 수 있습니다. 하지만 PBS로 세척해도 DAPI 염색은 제거되지 않습니다.

EverBrite™ 경화식 또는 EverBrite™ 습식 배지로 슬라이드에 마운팅된 커버슬립의 경우, 커버슬립이 미끄러져 떨어질 때까지 슬라이드 병에서 PBS에 몇 시간 동안 부드럽게 흔들면서 담가둘 수 있습니다 (샘플을 손상시킬 수 있는 커버슬립을 억지로 떼어내거나 당기는 것을 피하십시오). 그런 다음 슬라이드를 여러 번 세척하여 남아 있는 마운팅 배지를 모두 제거하십시오. 커버슬립이 CoverGrip™ Coverslip Sealant로 봉입된 경우, PBS에 담그면 봉입제도 함께 제거됩니다. 다른 유형의 커버슬립 봉입제를 제거하려면 다른 방법이 필요할 수 있습니다.

5. CoverGrip™ Coverslip Sealant는 제거 가능한가요?

CoverGrip™은 습식 마운팅된 커버슬립의 영구적인 봉입을 위해 매니큐어를 대체하도록 설계되었습니다. 슬라이드를 버퍼에 담가 제거할 수 있습니다. CoverGrip™은 하이브리드화를 위한 제거 가능한 임시 봉합용으로는 설계되지 않았습니다.

6. EverBrite™ Mounting Medium을 사용할 때 높은 UV/파란색 배경 자가형광(autofluorescence)이 보입니다. 이것이 예상되는 현상인가요? 어떻게 줄일 수 있나요?

EverBrite™ Mounting Medium은 보라색 여기(excitation) 시 높은 배경 형광을 보입니다. 배경은 UV 여기와 DAPI 필터 큐브를 사용한 에피형광(epifluorescence)으로 이미지화할 때 더 두드러지지만, 405 nm 레이저를 사용한 공초점 현미경(confocal imaging)에서는 일반적으로 상당히 낮습니다.


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