EvaGreen™ qPCR dye | SYBR Green I 대체 | 고마바이오텍

EvaGreen (#31000) 

• EvaGreen은 기존에 셋팅된 조건의 변화없이 SYBR Green I을 대체하여 정량 PCR (qPCR) 등에 사용할 수 있습니다.
• "release-on-demand" DNA-결합 기술을 이용하여 PCR inhibition이 거의 없습니다.
• SYBR® Green I보다 높은 감도로 형광이 매우 밝습니다.
• 돌연변이를 일으키지 않으며, 세포독성이 없는 제품으로 별도의 분리수거 없이 처리가 간편합니다.
• 보관 또는 PCR 사용시 열, 빛, 산-염기 조건에서도 매우 안정합니다.
• qPCR, HRM®, LAMP, digital PCR, tHDA, Multiplex PCR에 사용 가능합니다.
• Spectral Properties :
  - λabs = 471 nm (without DNA)
  - λabs/λem = 500/530 nm (with DNA)

Excitation (left) and emission (right) spectra of EvaGreen® Dye bound to dsDNA in TBE buffer 

EvaGreen® Dye binds to dsDNA via a novel “release-on-demand” mechanism.  : 

EvaGreen DNA 결합 염료는 유연한 spacer로 연결된 두개의 단량체로 구성되어 있으며, DNA가 없는 경우 비활성인 고리형태를 취하지만, DNA가 있을 경우 활성화되어 DNA에 결합하여 형광을 방출할 수 있는 형태로 shift 됩니다.  

EvaGreen Plus (#31077)

• 기존 original EvaGreen® Dye 보다 더 낮은 background와 높은 시그널 감도를 갖도록 향상된  qPCR dye입니다.
• 대부분의 qPCR 장비의 excitation source에 최적화되어 있습니다.
• Real-Time PCR 시 Ct (역치 사이클) 값을 더 빠르게 도출해 낼 수 있습니다.
• digital PCR 또는 isothermal application 방법의 LAMP 증폭 실험과 같이 noise가 많은 기법에서도 높은 signal을 확인할 수 있습니다.
• Spectral Properties :
  - Ex = 460 nm (without DNA)
  - Ex/Em = 487/525 nm

Escitation (left), emission (right) spectra of EvaGreen Plus dye bound to dsDNA in 1M Tris buffer, pH 8.5.  

* Original EvaGreen® Dye 와의 비교 데이터

A comparison of the raw fluorescence signals from qPCR reactions performed with EvaGreen® Plus Dye (Solid, Dark Green) and original EvaGreen® Dye (Dashed, Light Green), two replicates each. EvaGreen® Plus Dye gives an earlier Ct, has a lower background, and higher maximum signal intensity. 

A comparison of EvaGreen® Dyes during melt curve analysis. EvaGreen® Plus Dye (Solid, Dark Green) and original EvaGreen® Dye (Dashed, Light Green), two replicates each. The raw fluorescence melt plot (A) reveals that EvaGreen® Plus Dye is brighter when bound to dsDNA and has a lower post-melt background fluorescence. The derivative melt plot (B) displays no significant shift to melt temperatures or DNA disassociation characteristics.