유전자 클로닝 | GenBuilder DNA/DNA Plus Cloning Kit | 고마바이오텍

특징 

• 특수 효소 믹스를 사용하여 여러 개의 DNA 조각을 한 번에, 매끄럽게 선형 벡터에 삽입합니다.
• 각 DNA 조각 끝에 있는 15~40 bp의 중첩 서열을 인식하여 정밀하게 결합합니다.
• 특정 재조합 부위나 보조 서열이 필요 없으며, 복잡한 제한 효소 처리나 ligation 과정을 생략할 수 있습니다.
• 어떤 선형화된 벡터라도 사용이 가능합니다.

주요 제품

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Kit 구성품 

• GenBuilder™ DNA 2X Master Mix 
• Positive Control

적용

• single/multi-gene의 1-step 클로닝을 이용한 벡터 제작
• ssDNA를 이용한 gene mutation (addition, deletion and point mutation of base pairs)
• ssDNA를 bridge로 사용한 Codon saturation mutagenesis
  
• High throughput cloning 등

실험 과정

1. DNA 조각과 assembly용 linearized vector 준비

2. GenBuilder™ master mix에 DNA 조각과 linearized vector를 넣어 잘 혼합한 뒤 50°C 에서 15분간 배양

3. Assembly를 competent cell로 transformation 하여 selective medium에 plating 후 colony 획득 

실험 데이터

그림 1. 다양한 DNA Assembly 방식을 이용한하여 5 개의 PCR 조각을 vector에 cloning. 0.7 kb부터 1.6kb 길이의 PCR 조각을 single-step 반응으로 pUC57에 assemble한 결과. 타사의 제품에 비해 GenBuilder가 가장 높은 cloning efficiency를 보여줌.

그림2. DNA fragments의 수를 증가하며 Assembly efficiency 비교. ​

그림 3. GenBuilder^TM과 GenBuilder^TM Plus kit를 이용하여 다양한 수의 DNA fragments assembly 획득

그림 4. DNA insert의 overlap base pair 길이에 의한 cloning efficiency 비교